[1]张浩楠,高建伟.玉米赤霉烯酮完全抗原的制备及鉴定[J].黑龙江农业科学,2021,(06):87-92.[doi:10.11942/j.issn1002-2767.2021.06.0087]
[J].HEILONGJIANG AGRICULTURAL SCIENCES,2021,(06):87-92.[doi:10.11942/j.issn1002-2767.2021.06.0087]
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[J].HEILONGJIANG AGRICULTURAL SCIENCES,2021,(06):87-92.[doi:10.11942/j.issn1002-2767.2021.06.0087]
玉米赤霉烯酮完全抗原的制备及鉴定
《黑龙江农业科学》[ISSN:1002-2767/CN:23-1204/S]
卷:
期数:
2021年06
页码:
87-92
栏目:
出版日期:
2021-06-10
- 文献标志码:
- A
- 摘要:
- 为了降低基层检测部门检测谷物中玉米赤霉烯酮（ZEN）的成本，研制国产化检测试剂盒非常必要，而试剂盒的研制离不开完全抗原的支持。本试验的主要内容是将ZEN肟化，生成玉米赤霉烯酮肟(ZENO)，再用DCC-NHS活性酯法将ZENO与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵白蛋白（OVA）偶联合成ZEN完全抗原，最后透析将未偶联的小分子ZEN除去，得到的即为完全抗原。包被原ZEN-BSA浓度为1.62 mg?mL-1，免疫原ZEN-OVA浓度为1.33 mg?mL-1。采用UV法、SDS-PAGE法对完全抗原进行鉴定，同时建立间接ELISA方法验证包被原ZEN-BSA。结果表明：采用活性酯法合成的ZEN完全抗原在319 nm处出现新的吸收峰，且SDS-PAGE图表明ZEN-BSA分子量集中在60~70 kDa，ZEN-OVA分子量集中在40~50 kDa，不同于BSA和OVA分子量，但相差不大。根据紫外扫描图计算得到ZEN-BSA结合比为7.0∶1，ZEN-OVA结合比为6.1∶1。根据免疫学方法可知，OD450 nm值随着毒素浓度的增加而减小。本试验利用3种方法对ZEN完全抗原进行鉴定，证明ZEN完全抗原偶联成功。
备注/Memo
收稿日期：2021-02-06基金项目：黑龙江省教育厅高教强省优势特色学科-玉米重点专项（LTSW201729）；黑龙江省教育厅植物性食品加工技术特色学科专项（YSTSXK201826）；齐齐哈尔市科技计划市校合作项目（SXSP-2019003）；黑龙江省教育厅基本业务专项（135509321）；黑龙江省自然科学基金留学归国人员科学基金（LC2017014）；黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才培养计划项目(UNPYSCT-2017157)。第一作者：张浩楠（1995-），女，在读硕士，从事食品营养与安全研究。E-mail：237686729@qq.com。通信作者：高建伟（1982-），男，博士，讲师，从事食品营养与安全研究。E-mail：16900279@qq.com。
更新日期/Last Update:
2021-07-21