XU Ben-bo,XIE Ling-li,YAN Han,et al.Research on the Methods of Isolation of RNA from Oilseeds(Brassica na pus. L)[J].HEILONGJIANG AGRICULTURAL SCIENCES,2007,(05):18-20.[doi:10.11942/j.issn1002-2767.2007.05.0018]
甘蓝型油菜籽粒RNA 提取方法的探讨
- Title:
- Research on the Methods of Isolation of RNA from Oilseeds(Brassica na pus. L)
- 文章编号:
- 1002 - 2767(2007)05 - 0018 - 03
- Keywords:
- Brassica napus L. ; RNA ext raction method ; CTAB
- 分类号:
- S565. 4
- 文献标志码:
- A
- 摘要:
- 用C TAB 法、SDS 法、上海华瞬植物叶RNA 抽提试剂盒分别提取甘蓝型油菜花后40 d 的籽粒 RNA 。用电泳法和A260 /A280 与A260 /A280 的比值比较提取RNA 的质量。结果发现:用SDS 法、上海华瞬植物叶RNA 抽提试剂盒都没有成功提取RNA, 只有CTAB 法成功地提取出了完整的甘蓝型油菜籽粒RNA 。用CT AB 法提取的总RNA 的A260 /A230 与A260 /A280 的值分别为2. 06 和 1. 94 , 说明采用该方法提取的RNA 污染小, 纯度较高, 获得的RNA 产量也较高。通过逆转录实验和基因片段的克隆也证明获得的RNA 质量比较高, 可以直接满足一般的分子实验。
- Abstract:
- Based on the methods o f CTAB , SDS and Plant (Leave s) To tal RNA Isolatio n Kit , total RNA wa s iso lated from seeds of 40 day s o f f low er fr om Braccica napus. L. The to tal RNA was compared by g el electro pho resis and the r atio of A260 /A280 and A260 /A230. RNA only w as separated successfully f rom the seeds by the methods o f C TAB. The shar pness of 28S bands w as tw ice than 18S of bands and the ratio of A260 /A280 and A260 / A230 o f RNA was 1. 94 and 2. 06 , respectively . It indicated the quality of RNA w as hig h , reve rse tr anscription pr oved the quality of RNA w as fine eno ug h for ecumenical ex perimentatio n.
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备注/Memo
收稿日期:2006 - 09 - 30
基金项目:长江大学博士启动基金项
第一作者简介:许本波(1977 -), 男, 湖北安陆人, 博士, 讲师, 主要从事基因工程研究。T el:0716 - 8066812 ;E - mail:benboxu @y angt zedu . edu. cn 。