[1]李朋朋,尤扬,刘可,等.玉米鞘腐病菌ISSR-PCR反应体系优化[J].黑龙江农业科学,2021,(01):68-72.[doi:10.11942/j.issn1002-2767.2021.1.0068]
[J].HEILONGJIANG AGRICULTURAL SCIENCES,2021,(01):68-72.[doi:10.11942/j.issn1002-2767.2021.1.0068]
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玉米鞘腐病菌ISSR-PCR反应体系优化
《黑龙江农业科学》[ISSN:1002-2767/CN:23-1204/S]
卷:
期数:
2021年01
页码:
68-72
栏目:
出版日期:
2021-01-10
- 文献标志码:
- A
- 摘要:
- 玉米鞘腐病的主要病原为层出镰孢(Fusarium proliferatum),为明确其ISSR-PCR最佳反应体系,本文以层出镰孢DNA为模板,筛选各因子浓度范围,利用单因素试验,对5因素进行优化,确定最佳反应体系,从13条供试引物中筛选扩增条带清晰、多态性好的引物,并筛选最适退火温度。结果表明:ISSR-PCR最佳反应体系各因子浓度分别为模板DNA 40 ng?μL-1、镁离子浓度2.5 mmol?L-1、引物浓度为0.4 μmol?L-1、dNTPs浓度0.2 mmol?L-1、Taq酶浓度为2.5 U?μL-1,最适ISSR引物为808,最适退火温度是58 ℃,用筛选的最适引物808对供试菌株扩增出14条条带,多态性条带13条,多态性条带比率为92.90%。
相似文献/References:
[1]梁春波.利用正交设计优化向日葵ISSR-PCR反应体系[J].黑龙江农业科学,2014,(10):16.
LIANG Chun-bo.Optimization of ISSR-PCR System for Sunflower Based on Orthogonal Design[J].HEILONGJIANG AGRICULTURAL SCIENCES,2014,(01):16.
备注/Memo
收稿日期:2020-10-22基金项目:河北省高等学校科学技术研究项目(QN2018055);河北工程大学博士科研启动基金。第一作者:李朋朋(1987-),女,博士,讲师,从事植物病理学研究。E-mail:726508104@qq.com。
更新日期/Last Update:
2021-02-23