《黑龙江农业科学》 2017年08期
57-59
出版日期：2017-08-10
ISSN:1002-2767
CN:23-1204/S
西花蓟马人工繁殖技术
西花蓟马(Frankliniella occidentalis(Pergande)) 是一种危险性的世界性检疫害虫，可危害500多种植物，在蔬菜和花卉上发生危害尤其严重。我国大陆于2003年在北京大棚辣椒上首次发现，现已扩散至浙江、云南、山东、贵州等多个省市[1-2]。该虫个体小、危害隐蔽、世代短、繁殖能力和抗药性强,植株受害后出现白色斑点、条斑、叶片卷曲、新梢或者叶尖萎蔫、坏死等症状，同时能传播病毒，如目前已发现西花蓟马能传播多种植物病毒，最重要的是嵌纹斑点病毒（INSV）和番茄斑点萎蔫病毒（TSWV）等病毒。在花卉上危害时常造成花芽不能正常萌发、花瓣变形和花瓣上出现污点等，近年来云南花卉产业迅猛发展，花卉种植面积急剧增加，西花蓟马的危害日趋严重，严重影响花卉的外观品质，成为制约花卉品质提高的重要因素之一。近年来关于西花蓟马的研究热点主要集中在西花蓟马与植物、病原微生物互作对西花蓟马免疫反应、植物防御基因的影响等防治技术的研究上 [3-4]。要控制该虫害的进一步发展，首先必须提供大量发育一致的虫源，以便进行综合防治技术的深入研究。目前，国内外已报道了多种蓟马的人工饲养方法，主要是采用将栽培的寄主植物放于网箱用于蓟马的饲养[5-7]，国内也有用凹玻片饲养棕榈蓟马的报道[8]，不仅操作繁琐，取样受季节限制，而且不能大量进行蓟马人工饲养。本研究通过在室内利用香石竹组培苗作为寄主植物，对西花蓟马进行多代饲养，建立起一种西花蓟马室内饲养的方法，以期为该虫的综合防治研究提供技术支撑。1材料与方法1.1材料西花蓟马成虫采自昆明晋宁切花月季生产基地。寄主植物为通过常规途径生产出的香石竹组培瓶苗，苗高5 cm左右。1.2方法1.2.1饲养条件人工气候箱温度（25±2）℃，光周期16L∶8D。1.2.2成虫采集在室内选用无病虫害、生长健壮的香石竹植株作为产卵基质，插入盛装适量水的容器内保水，将活动性强的西花蓟马成虫接入，放入养虫箱，产卵2 d。1.2.3标本的制作采用张宏瑞等[9]使用的方法，将保存的成虫从70%乙醇溶液中挑出，浸入5%NaOH溶液中浸解脱色，洗涤后置于不同浓度乙醇中脱水，整姿封盖，置入45～50 ℃电热鼓风干燥箱内烘14~21 d即可。1.2.4接外植体取香石竹茎段（西花蓟马成虫产卵后的植株），剥除叶片，用自来水冲洗10 min。然后在超净工作台上，将茎段用75%的酒精消毒5 s，再用0.1%的氯化汞溶液消毒15～20 min，用无菌水冲洗5～6次，待用。将消毒后的茎段接种在诱导培养基（MS+6-BA0.5 mg?L-1+IAA2.0 mg?L-1）上诱导丛生芽，培养基预先在121 ℃湿热灭菌15 min，在培养基表面铺一层厚度2～3 mm灭过菌的沙作为化蛹基质。放入人工气候箱，羽化后的成虫作为虫源。1.2.5饲养方法将羽化后成虫接种到新鲜寄主植物上。在寄主植物上产卵12 h，去除叶片上的成虫，将瓶苗放入人工气候箱。上述操作过程均在超净工作台上进行，脱离超净工作台的香石竹组培瓶苗瓶口均封闭。每天9：00和16：00在体式显微镜下观察组培苗表面卵的孵化及若虫发育进度。〖BW(S(S,,)〗〖BG(!〗〖BHDWG1*2,WK7ZQ0,WK27,WK10YQ0W〗〖TP植物保护.TIF,Z〗[]黑龙江农业科学〖〗8期〖BG)Z〗〖BW)〗〖BW(D(S,,)〗〖BG(!〗〖BHDWG1*2,WK4ZQ0,WK32,WK8YQ0W〗8期张丽芳等：西花蓟马人工繁殖技术[]〖TP植物保护.TIF,Y〗〖BG)Z〗〖BW)〗2结果与分析2.1西花蓟马鉴定特征西花蓟马单眼间鬃着生于前、后单眼外缘连线上，复眼后鬃长，最长的鬃几与单眼间鬃等长（见图1和图2），这是西花蓟马最重要的特征之一，再结合其它鉴定特征，在生物显微镜下鉴定西花蓟马[10-12]。2.2西花蓟马饲养存活率及发育历期利用上述方法，西花蓟马每个世代的饲养设3个重复，连续饲养3代，结果较为理想，平均存活率超过80%(见表1)，在上述饲养条件下西花蓟马完成1代大约需要14 d（见表2）。该研究结〖LL〗果表明此方法可以用于室内进行西花蓟马种群的建立和繁殖。〖TPZLF1.TIF，BP#〗〖TS（〗〖HT6SS〗图1西花蓟马成虫形态Fig.1Morphology of Frankliniella occidentalis adults〖TPZLF2.TIF，BP#〗图2西花蓟马成虫不同部位形态（a～e）Fig.2Morphology of different parts of Frankliniella occidentalis adults（a～e）〖JZ）〗〖TS）〗〖FL)〗〖JZ(〗〖HTH〗表1不同龄期西花蓟马的存活率 〖WTHZ〗Table 1Survival rates of different stages of Frankliniella occidentalis〖WTBZ〗〖JZ)〗〖HT6SS〗 〖BG（〗〖BHDFG6,WK8,WKW〗世代Generation〖〗〖ZB（〗〖BHDFG2,WKW〗存活率/% Survival rate〖BHDG4,WK4,WK11。2,WK9,WKW〗卵Egg〖〗一龄若虫1st instar nymph〖〗二龄若虫2nd instar nymph〖〗预蛹Pre-pupa〖〗蛹Pupa〖ZB）W〗〖BHDG2,WK8,WK4,WK11。2,WK9,WKW〗1〖〗—〖〗81.5〖〗91.3〖〗70.0〖〗84.3〖BHDW〗2〖〗—〖〗84.1〖〗90.9〖〗75.3〖〗85.4.〖BH〗3〖〗—〖〗82.2〖〗92.1〖〗72.6〖〗83.8〖BH〗平均 Average〖〗—〖〗82.6±1.3〖〗91.4±0.6〖〗72.6±2.6〖〗84.5±0.8〖BG）F〗由于无法记录起始卵量，所以未统计卵存活率。表内数据为平均值±标准差。下同。Not analyze the survival rates of eggs because not record the initial number of eggs.Data in the table are average± SE.The same below.〖KH-*1〗〖JZ(〗〖HTH〗表2西花蓟马发育历期（25±2 ℃）〖WTHZ〗Table 2Developmental duration of Frankliniella occidentalis（25±2 ℃） 〖WTBZ〗〖JZ)〗〖HT6SS〗〖BG（〗〖BHDFG4,WK8,WK11。2,WK9。2,WKW〗卵/dEgg〖〗一龄若虫/d1st instar nymph〖〗二龄若虫/d2nd instar nymph〖〗预蛹/dPre-pupa〖〗蛹/dPupa〖〗未成熟期/dPre-adult〖BHDG2〗3.9±0.5〖〗2.1±0.3〖〗3.2±0.3〖〗1.5±0.5〖〗2.9±0.3〖〗13.5±0.5〖BG）F〗3结论与讨论从野外采集到的西花蓟马成虫虫体带有大量灰尘及细菌，容易污染培养基，因此采取预先在香石竹植株产卵的方法获取清洁虫源。香石竹茎段有较厚的植物组织和较高的含水量，有利于西花蓟马成虫产卵，由于西花蓟马成虫产卵于植物组织内部，因此茎段取下后消毒、灭菌等处理对植物组织以及植株组织内部卵块的活力没有影响。香石竹外植体接种到培养基后，长出新枝，随着新枝数量增多，及时提供充足的饲料满足西花蓟马各龄若虫的饲喂及发育，最终获得清洁虫源。本方法一改之前芸豆、黄豆苗等蔬菜在相对开放的环境条件下饲养蓟马的方法，创新性的采用香石竹组培苗在相对密闭、模拟自然的环境条件下进行西花蓟马的人工饲养。香石竹组培苗叶片鲜嫩，数量充足，本研究以香石竹组培苗为寄主进行西花蓟马的大量人工饲养，不需要特定的养虫室，不需要考虑虫源对周围环境的扩散和破坏，步骤简单，能及时满足西花蓟马若虫和成虫发育的需要，饲喂效果较好，只需接种清洁成虫到组培苗上即可，方法简便可行。此方法不需要较频繁地更换饲料，一方面避免了对西花蓟马若虫和成虫发育的干扰，有利于西花蓟马若虫和成虫正常发育；另一方面节约了较频繁地更换饲料的时间，简化了饲养步骤，提高了饲养效率，能在短时期内获得大量发育速率一致的虫源，不受外界环境条件的影响，一年四季均可为西花蓟马综合防治方法的研究提供持续、稳定的虫源。